یکی از موارد جالبی که در جریان تهیه یکی از محصولات موضعی برایم پیش آمد آلودگی میکروبی این محصول به شکل عجیبی بود، پرزواتیو این محصول ماده Benzlakonium chloride بوده است که برای محصول موضعی و مخاطی پرزواتیو مناسب و توصیه شده ای می باشد این پرزواتیو در غلظت 0.04% در محصول به کار رفته بود که براساس مرجع Handbook of excipients مقدار به کار رفته بیشتر از حد مجاز بوده است. این محصول به صورت آزمایشی و برای بررسی شرایط پایداری ساخته شد و تست های لازم برای پایداری محصول براساس مونوگراف فارماکوپه بدون مشکلی انجام شد همچنین تست Preservative effectivness نیز با 5 گونه باکتری برروی این محصول در یک دوره 28 روزه انجام شد و نتایچ نشان دهنده موثر بودن این پرزواتیو بود.

در جریان تولید بچ صنعتی این محصول  آلودگی در محصول مشاهده شد و با زمان دادن به محصول جهت تاثیر پرزواتیو سعی در کاهش بار آلودگی داشتیم ، متاسفانه بار آلودگی میکروبی محصول بالاتر رفت و عملا نتایج میکروبی نشان دهنده fail شدن این محصول بوده است. برای این منظور بررسی دقیقتری طراحی شد به نحوی که ساخت یک نمونه پایلوت با کنترل تمامی ریسک های آلودگی در نظر گرفته شد به این شرح:

1- تمامی مواد جانبی از نظر بار میکروبی مجدد کنترل و تست شد.

2- تمامی مواد بسته بندی به کار رفته از نظر بار میکروبی مجدد کنترل و تست شد.

3- ساخت نمونه با دو نوع پرزواتیو بنزالکونیم کلراید مربوط به یکی از شرکتهای معتبر داروسازی و شرکت خودمان طرحی گردید.

4- مقدار به کار رفته بنزالکونیم کلراید در دو غلظت 0.02% و 0.04% تنظیم گردید.

5-  یکی از نمونه های با پرزواتیو بنزیل الکل به مقدار 1% ساخته شد.

6- تمامی شرایط فوق یعنی دو غلظت پرزواتیو بنزالکونیم کلراید و نیز غلظت 1% بنزیل الکل با آب بدون محصول ساخته شد.

در مجموع 12 نمونه (6 نمونه جاوی محصول و 6 نمونه حاوی آب با پرزواتیو) ساخته شد و برای آن کد داخلی تهیه شد.

اینکوباسیون در دمای 35 درجه در 72 ساعت انجام شد و نتایج بدست آمده نشان می داد که تمامی نمونه های آب باز میکروبی ندارد و تمامی نمونه های جاوی محصول که دارای بنزالکونیم کلراید است آلودگی نشان می دهد و نمونه حاوی بنزیل الکل فاقد باز میکروبی است.

بررسی گونه باکتری در نمونه های آلوده و مقایسه آن با نمونه های قبلی یکسان بودن نوع آلودگی را نشان می دهد. ( نوع آلودگی از نوع Aeromonas می باشد.)

براساس مقاله پیوست شده این گونه باکتری که هوازی می باشد و غیر پاتوژن است توانایی تخریب بنزالکونیم کلراید را دارد و می تواند مقدار آن را کاهش دهد به نحوی که عملا محصول فاقد پرزواتیو محسوب می گردد. (نمونه فاقد پرزواتیو و دارای پرزواتیو با مقادیر متفاوت بارمیکروبی تقریبا یکسانی نشان می دهند.)

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1046/j.1365-2672.2003.01829.x